Existem duas fontes principais de contaminação em salas limpas: partículas e microorganismos, que podem ser causados por fatores humanos e ambientais, ou atividades relacionadas no processo. Apesar dos melhores esforços, a contaminação ainda penetrará na sala limpa. Os portadores de contaminação comuns específicos incluem corpos humanos (células, cabelos), fatores ambientais como poeira, fumaça, névoa ou equipamentos (equipamentos de laboratório, equipamentos de limpeza) e técnicas e métodos de limpeza inadequados.
O portador de contaminação mais comum são as pessoas. Mesmo com as roupas e os procedimentos operacionais mais rigorosos, os operadores mal treinados são a maior ameaça de contaminação em salas limpas. Os funcionários que não seguem as diretrizes para salas limpas são um fator de alto risco. Contanto que um funcionário cometa um erro ou esqueça uma etapa, isso levará à contaminação de toda a sala limpa. A empresa só pode garantir a limpeza da sala limpa através do monitoramento contínuo e da atualização contínua dos treinamentos com taxa zero de contaminação.
Outras fontes importantes de contaminação são ferramentas e equipamentos. Se um carrinho ou uma máquina for limpo apenas grosseiramente antes de entrar na sala limpa, poderá trazer microorganismos. Muitas vezes, os trabalhadores não sabem que o equipamento com rodas rola sobre superfícies contaminadas ao ser empurrado para a sala limpa. As superfícies (incluindo pisos, paredes, equipamentos, etc.) são rotineiramente testadas para contagens viáveis usando placas de contato especialmente projetadas contendo meios de crescimento, como Trypticase Soy Agar (TSA) e Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA é um meio de crescimento desenvolvido para bactérias e SDA é um meio de crescimento desenvolvido para fungos e leveduras. TSA e SDA são normalmente incubados em temperaturas diferentes, com TSA exposto a temperaturas na faixa de 30-35˚C, que é a temperatura ideal de crescimento para a maioria das bactérias. A faixa de 20-25˚C é ideal para a maioria das espécies de fungos e leveduras.
O fluxo de ar já foi uma causa comum de contaminação, mas os atuais sistemas HVAC para salas limpas praticamente eliminaram a contaminação do ar. O ar na sala limpa é controlado e monitorado regularmente (por exemplo, diariamente, semanalmente, trimestralmente) para contagem de partículas, contagens viáveis, temperatura e umidade. Os filtros HEPA são usados para controlar a contagem de partículas no ar e têm a capacidade de filtrar partículas de até 0,2 µm. Esses filtros geralmente são mantidos funcionando continuamente a uma vazão calibrada para manter a qualidade do ar na sala. A umidade geralmente é mantida em um nível baixo para evitar a proliferação de microorganismos como bactérias e fungos que preferem ambientes úmidos.
Na verdade, o nível mais alto e a fonte mais comum de contaminação em salas limpas é o operador.
As fontes e vias de entrada da contaminação não variam significativamente de indústria para indústria, mas existem diferenças entre indústrias em termos de níveis de contaminação toleráveis e intoleráveis. Por exemplo, os fabricantes de comprimidos ingeríveis não necessitam de manter o mesmo nível de limpeza que os fabricantes de agentes injectáveis que são introduzidos directamente no corpo humano.
Os fabricantes farmacêuticos têm uma tolerância menor à contaminação microbiana do que os fabricantes de eletrônicos de alta tecnologia. Os fabricantes de semicondutores que produzem produtos microscópicos não podem aceitar qualquer contaminação por partículas para garantir a funcionalidade do produto. Portanto, essas empresas se preocupam apenas com a esterilidade do produto a ser implantado no corpo humano e com a funcionalidade do chip ou celular. Eles estão relativamente menos preocupados com mofo, fungos ou outras formas de contaminação microbiana em salas limpas. Por outro lado, as empresas farmacêuticas estão preocupadas com todas as fontes de contaminação vivas e mortas.
A indústria farmacêutica é regulamentada pela FDA e deve seguir rigorosamente os regulamentos de Boas Práticas de Fabricação (GMP) porque as consequências da contaminação na indústria farmacêutica são muito prejudiciais. Os fabricantes de medicamentos não só têm de garantir que os seus produtos estão livres de bactérias, como também têm de ter documentação e acompanhamento de tudo. Uma empresa de equipamentos de alta tecnologia pode enviar um laptop ou TV, desde que seja aprovado na auditoria interna. Mas não é assim tão simples para a indústria farmacêutica, razão pela qual é crucial para uma empresa ter, utilizar e documentar procedimentos operacionais de salas limpas. Devido a considerações de custo, muitas empresas contratam serviços de limpeza profissionais externos para realizar serviços de limpeza.
Um programa abrangente de testes ambientais em salas limpas deve incluir partículas transportadas pelo ar visíveis e invisíveis. Embora não haja exigência de que todos os contaminantes nesses ambientes controlados sejam identificados por microrganismos. O programa de controle ambiental deve incluir um nível apropriado de identificação bacteriana nas extrações de amostras. Existem muitos métodos de identificação bacteriana disponíveis atualmente.
O primeiro passo na identificação bacteriana, especialmente quando se trata de isolamento de salas limpas, é o método de coloração de Gram, pois pode fornecer pistas interpretativas sobre a fonte de contaminação microbiana. Se o isolamento e identificação microbiana mostrarem cocos Gram-positivos, a contaminação pode ter vindo de humanos. Se o isolamento e identificação microbiana mostrarem bastonetes Gram-positivos, a contaminação pode ter vindo de cepas resistentes a poeira ou desinfetantes. Se o isolamento e identificação microbiana mostrarem bastonetes Gram-negativos, a fonte de contaminação pode ter vindo da água ou de qualquer superfície molhada.
A identificação microbiana em salas limpas farmacêuticas é muito necessária porque está relacionada a muitos aspectos de garantia de qualidade, como bioensaios em ambientes de fabricação; testes de identificação bacteriana de produtos finais; organismos sem nome em produtos estéreis e água; controle de qualidade da tecnologia de armazenamento de fermentação na indústria de biotecnologia; e verificação de testes microbianos durante a validação. O método da FDA para confirmar que as bactérias podem sobreviver em um ambiente específico se tornará cada vez mais comum. Quando os níveis de contaminação microbiana excedem o nível especificado ou os resultados dos testes de esterilidade indicam contaminação, é necessário verificar a eficácia dos agentes de limpeza e desinfecção e eliminar a identificação de fontes de contaminação.
Existem dois métodos para monitorar superfícies ambientais de salas limpas:
1. Placas de contato
Esses pratos de cultura especiais contêm meio de crescimento estéril, preparado para ficar mais alto que a borda do prato. A tampa da placa de contato cobre a superfície a ser amostrada e quaisquer microorganismos visíveis na superfície irão aderir à superfície do ágar e incubar. Esta técnica pode mostrar o número de microrganismos visíveis em uma superfície.
2. Método de esfregaço
Este é estéril e armazenado num líquido estéril adequado. O swab é aplicado na superfície de teste e o microrganismo é identificado recuperando o swab no meio. Os cotonetes são frequentemente usados em superfícies irregulares ou em áreas difíceis de coletar amostras com uma placa de contato. A amostragem de swab é mais um teste qualitativo.
Horário da postagem: 21 de outubro de 2024