Existem duas fontes principais de contaminação na sala limpa: partículas e microorganismos, que podem ser causados por fatores humanos e ambientais ou atividades relacionadas no processo. Apesar dos melhores esforços, a contaminação ainda penetrará na sala limpa. Os portadores de contaminação comum específicos incluem corpos humanos (células, cabelos), fatores ambientais como poeira, fumaça, névoa ou equipamento (equipamentos de laboratório, equipamentos de limpeza) e técnicas de limpeza inadequadas e métodos de limpeza.
O portador de contaminação mais comum são as pessoas. Mesmo com as roupas mais rigorosas e os procedimentos operacionais mais rigorosos, os operadores treinados incorretamente são a maior ameaça de contaminação na sala limpa. Os funcionários que não seguem as diretrizes da sala limpa são um fator de alto risco. Enquanto um funcionário cometer um erro ou esquecer um passo, isso levará à contaminação de toda a sala limpa. A empresa só pode garantir a limpeza da sala limpa por monitoramento contínuo e atualização contínua do treinamento com taxa de contaminação zero.
Outras fontes importantes de contaminação são ferramentas e equipamentos. Se um carrinho ou uma máquina for apenas limpada antes de entrar na sala limpa, poderá trazer microorganismos. Muitas vezes, os trabalhadores não sabem que o equipamento de rodas rola sobre superfícies contaminadas à medida que é empurrado para a sala limpa. As superfícies (incluindo pisos, paredes, equipamentos etc.) são rotineiramente testadas para contagens viáveis, usando placas de contato especialmente projetadas contendo meios de crescimento, como o Agar de Soja Tripticase (TSA) e Sabouraud Dextrose Agar (SDA). O TSA é um meio de crescimento projetado para bactérias, e o SDA é um meio de crescimento projetado para moldes e leveduras. TSA e SDA são tipicamente incubados em diferentes temperaturas, com o TSA exposto a temperaturas na faixa de 30-35 ° C, que é a temperatura de crescimento ideal para a maioria das bactérias. A faixa de 20-25 ° C é ideal para a maioria das espécies de mofo e levedura.
O fluxo de ar já foi uma causa comum de contaminação, mas os sistemas de HVAC de sala de limpeza de hoje praticamente eliminaram a contaminação do ar. O ar na sala limpa é controlada e monitorada regularmente (por exemplo, diariamente, semanalmente, trimestralmente) para contagens de partículas, contagens viáveis, temperatura e umidade. Os filtros HEPA são usados para controlar a contagem de partículas no ar e têm a capacidade de filtrar partículas até 0,2 µm. Esses filtros geralmente são mantidos funcionando continuamente a uma taxa de fluxo calibrada para manter a qualidade do ar na sala. A umidade é geralmente mantida em um nível baixo para evitar a proliferação de microorganismos, como bactérias e mofo, que preferem ambientes úmidos.
De fato, o nível mais alto e a fonte de contaminação mais comum na sala limpa é o operador.
As fontes e as rotas de entrada de contaminação não variam significativamente da indústria para a indústria, mas existem diferenças entre as indústrias em termos de níveis toleráveis e intoleráveis de contaminação. Por exemplo, os fabricantes de comprimidos ingestíveis não precisam manter o mesmo nível de limpeza que os fabricantes de agentes injetáveis que são diretamente introduzidos no corpo humano.
Os fabricantes farmacêuticos têm uma menor tolerância à contaminação microbiana do que os fabricantes eletrônicos de alta tecnologia. Os fabricantes de semicondutores que produzem produtos microscópicos não podem aceitar nenhuma contaminação por partículas para garantir a funcionalidade do produto. Portanto, essas empresas estão preocupadas apenas com a esterilidade do produto a ser implantado no corpo humano e a funcionalidade do chip ou do telefone celular. Eles estão relativamente menos preocupados com mofo, fungo ou outras formas de contaminação microbiana na sala limpa. Por outro lado, as empresas farmacêuticas estão preocupadas com todas as fontes de contaminação vivas e mortas.
A indústria farmacêutica é regulamentada pelo FDA e deve seguir estritamente as boas práticas de fabricação (GMP) porque as consequências da contaminação na indústria farmacêutica são muito prejudiciais. Não apenas os fabricantes de medicamentos precisam garantir que seus produtos estejam livres de bactérias, mas também precisam ter documentação e rastreamento de tudo. Uma empresa de equipamentos de alta tecnologia pode enviar um laptop ou TV desde que passe sua auditoria interna. Mas não é tão simples para a indústria farmacêutica, e é por isso que é crucial para uma empresa ter, usar e documentar os procedimentos de operação limpa. Devido a considerações de custo, muitas empresas contratam serviços externos de limpeza profissional para executar serviços de limpeza.
Um programa abrangente de testes ambientais de sala limpa deve incluir partículas aéreas visíveis e invisíveis. Embora não haja exigência de que todos os contaminantes nesses ambientes controlados sejam identificados por microorganismos. O programa de controle ambiental deve incluir um nível apropriado de identificação bacteriana de extrações de amostras. Atualmente, existem muitos métodos de identificação bacteriana disponíveis.
A primeira etapa na identificação bacteriana, especialmente quando se trata de isolamento da sala limpa, é o método da mancha grama, pois pode fornecer pistas interpretativas à fonte de contaminação microbiana. Se o isolamento e identificação microbianos mostrarem cocos gram-positivos, a contaminação pode ter vindo de humanos. Se o isolamento e identificação microbianos mostrarem hastes Gram-positivas, a contaminação pode ter vindo de cepas resistentes a poeira ou desinfetantes. Se o isolamento e identificação microbianos mostrarem hastes Gram-negativas, a fonte de contaminação pode ter vindo da água ou de qualquer superfície úmida.
A identificação microbiana na sala limpa farmacêutica é muito necessária porque está relacionada a muitos aspectos da garantia da qualidade, como bioensaios em ambientes de fabricação; teste de identificação bacteriana de produtos finais; organismos sem nome em produtos estéreis e água; controle de qualidade da tecnologia de armazenamento de fermentação na indústria de biotecnologia; e verificação de testes microbianos durante a validação. O método da FDA de confirmar que as bactérias podem sobreviver em um ambiente específico se tornará cada vez mais comum. Quando os níveis de contaminação microbiana excedem o nível especificado ou os resultados dos testes de esterilidade indicam contaminação, é necessário verificar a eficácia dos agentes de limpeza e desinfecção e eliminar a identificação de fontes de contaminação.
Existem dois métodos para monitorar superfícies ambientais da sala limpa:
1. Placas de contato
Esses pratos de cultura especiais contêm meio de crescimento estéril, que está preparado para ser maior que a borda do prato. A tampa da placa de contato cobre a superfície a ser amostrada e quaisquer microorganismos visíveis na superfície aderirão à superfície do ágar e incubam. Essa técnica pode mostrar o número de microorganismos visíveis em uma superfície.
2. Método Swab
Isso é estéril e armazenado em um líquido estéril adequado. O swab é aplicado à superfície do teste e o microrganismo é identificado pela recuperação do swab no meio. Os swabs são frequentemente usados em superfícies irregulares ou em áreas difíceis de amostrar com uma placa de contato. A amostragem de swab é mais um teste qualitativo.
Hora de postagem: outubro-21-2024